（l）營養 猴頭菌馴化栽培成功后，可利用的碳源相當廣泛，如鋸木屑、甘蔗渣、棉籽殼（藥用猴頭菌忌用）、玉米芯和粉碎的稻草等。培養基含氮量以0.6％為宜。自然界樹皮中氮含量較心材高，可滿足其生長需要。人工培養時可在培養料中加人麥麩或米糠。猴頭菌生長也需要磷、鉀、鋅、銅、鐵等營養元素來提高菌絲的生理活性。此外，還需要一定量的維生素，尤其是硫胺素。一般從米糠等培養料中能得到滿足。
（2）溫度 猴頭菌為中溫性真菌。菌絲生長溫度范圍是6－30℃，生長溫度25℃左右，溫度過高菌絲生長細而稀，超過35℃菌絲完全停止生長。子實體形成溫度以15－20℃為適宜，低于14℃子實體變紅，并隨溫度下降而顏色加深，溫度高，子實體的刺長，球塊小、松，且常常形成分枝狀，25℃原基分化數量也明顯降低，30℃不能形成原基。
（3）濕度 猴頭菌生活的基質含水量和其基質的松緊度密切相關。培養基質地堅實的要求較低含水量，含水40％即可，如椴木。反之要求較高的含水量，如蔗渣基質，含水則以65％－70％為宜。菌絲生長期間，空氣相對濕度不宜超過65％。猴頭菌原基形成后，控制溫度85％－95％。如低于90%時子實體表面開始失水干萎，刺較短，生長緩慢、產量低。如果濕度超過95％，又會因通氣不良致使子實體畸形，多數表現為刺短，子實體分枝狀，球塊小嚴重時不形成球塊。
（4）空氣 猴頭菌是一種好氧菌類。對二氧化碳濃度十分敏感。菌絲生長階段，一般能忍受0.3％－1％，甚至更高濃度的二氧化碳含量。子實體生長階段對二氧化碳的含量極為敏感。通風不良，子實體不易分化或柄拉長，并會產生分枝，且刺彎凹成畸形，甚至影響到球心發育形成珊瑚狀分枝。一股子實體生長時，二氧化碳含量以不超過0.l％為好。
（5）光照 菌絲體生長階段不需要光，而子實體分化發育階段需要有微弱光照，有助于子實體正常形成。光照度10一50勒克斯。
（6）酸堿度 基質的pH為4。當pH大于7.5時，菌絲難以生長。在瓊脂培養基中通常用蘋果酸或檸檬酸酸化。在袋料栽培配制培養基時，按pH提高1－2即PH5－6為宜。
